Liquid cultures zijn populairder dan ooit onder paddenstoelkwekers. Dit is te wijten aan het feit dat het gebruik ervan zowel praktisch als veilig is. In dit artikel bespreken we de voor- en nadelen van vloeibare culturen en leggen we stap voor stap uit hoe je een liquid culture-spuit het beste gebruikt.
Inhoudsopgave
Wat is liquid culture?
Als we het over liquid culture hebben, bedoelen we een schimmelcultuur die groeit in een vloeistof. Deze vloeistof is zorgvuldig samengesteld en bevat suikers, zodat de schimmel erin kan leven en groeien. Een veelgebruikt ingrediënt voor de suikeroplossing is honing, omdat het goedkoop en makkelijk verkrijgbaar is. Naast het basisingrediënt kunnen er andere ingrediënten worden toegevoegd die de groei van de schimmel verder bevorderen.
Na samenstelling moet de vloeistof worden gesteriliseerd om ervoor te zorgen dat er geen levende micro-organismen meer in aanwezig zijn. Zo kan de schimmel ongestoord in de suikeroplossing groeien zonder besmetting door bacteriën of andere schimmels.
Inoculatie van liquid culture
Nadat de vloeistof is gesteriliseerd, moet er een schimmel aan worden toegevoegd. Dit proces heet inoculatie. Een liquid culture kan op verschillende manieren worden geïnoculeerd.
De eenvoudigste en snelste methode is het direct toevoegen van paddenstoelsporen aan de steriele suikeroplossing. Dit is echter ook de minst veilige methode, omdat er een aanzienlijke kans is dat de sporen gecontamineerd zijn. Aangezien besmetting in een liquid culture lastig vast te stellen is, kan dit een probleem vormen.
Bij een andere methode wordt eerst mycelium gecultiveerd op een agar voedingsbodem. Deze methode is een stuk veiliger, omdat op een agar voedingsbodem relatief eenvoudig te zien is of het mycelium vrij is van besmettingen. Wanneer dit het geval is, wordt een kleine hoeveelheid mycelium toegevoegd aan de steriele suikeroplossing, waarna het mycelium verder wordt opgekweekt.
Een groot voordeel van deze methode is dat het mogelijk is om liquid culture te maken van geselecteerde genetica. Bewezen en geteste genetica leiden doorgaans tot consistentere resultaten bij de paddenstoelteelt.
Wat zijn de voor- en nadelen van liquid culture?
Liquid cultures hebben verschillende voor- en nadelen. Hieronder volgt een beknopt overzicht, zodat je in één oogopslag een afweging kunt maken.
| Voordelen | Nadelen |
|---|---|
| ✅ Snelle kolonisatie dankzij meerdere inoculatiepunten | ❌ Gevoeliger voor besmetting en lastiger vast te stellen |
| ✅ Goedkoop te maken | ❌ Niet geschikt voor het selecteren van genetica |
| ✅ Relatief lang houdbaar wanneer gekoeld bewaard |
Hoe inoculeer je paddenstoelenbroed met een liquid culture spuit?
Het enten van paddenstoelenbroed met liquid culture is niet moeilijk, maar er zijn enkele zaken waarmee je rekening moet houden. Zo heb je verschillende benodigdheden en hulpmiddelen nodig. Daarnaast is het belangrijk om in een schone omgeving en op een hygiënische manier te werken. Lees verder om er meer over te weten te komen.
Benodigdheden
Essentieel
- Liquid culture spuit
- Gesteriliseerde granen in pot of zak voorzien micron luchtfilter(s) en injectiepoort
- Aansteker of gasbrander
- Mondkapje
- Nitril handschoenen
- Desinfectiemiddel
- Alcohol doekje(s)
Optioneel
- Flowkast
- Still air box (SAB)
Stappen
Voordat je begint met enten, is het belangrijk om een geschikte werkruimte te kiezen. Kies bij voorkeur een compacte ruimte met minimale luchtstroming, omdat deze eenvoudiger te desinfecteren is. Zodra je een geschikte werkruimte hebt gevonden en voorbereid, kun je verder met de onderstaande stappen.
1. Desinfecteer je handen
Begin met het aantrekken van nitrilhandschoenen. Desinfecteer ze met een geschikt desinfectiemiddel of met 70% isopropylalcohol en laat ze vervolgens aan de lucht drogen.
2. Desinfecteer de injectiepoort
Neem een alcoholdoekje en desinfecteer de injectiepoort(en) van je broedpotten of -zakken. Voor extra zekerheid kun je de alcoholdoekjes op de injectiepoorten laten liggen totdat je begint met de inoculatie.
3. Verwijder de beschermkap van de naald
Pak de liquid culture spuit en schud deze goed om het mycelium los te maken. Bevestig vervolgens de naald op de spuit. Voer deze handelingen zo snel mogelijk uit om besmetting te voorkomen.
Verwijder tot slot de beschermkap van de naald.
4. Verhit de naald
Verhit de naald met een aansteker of gasbrander om eventuele micro-organismen te doden die zich in de tussentijd op de naald hebben gevestigd.
Wees voorzichtig bij het gebruik van een gasbrander, omdat plastic onderdelen van de naald kunnen smelten bij oververhitting.
5. Plaats de naald in de injectiepoort
Laat de naald na het verhitten enkele seconden afkoelen om schade aan de injectiepoort te voorkomen. Verwijder vervolgens de alcoholdoekjes van de injectiepoort(en) en steek de naald erdoorheen.
6. Injecteer de liquid culture
Injecteer ongeveer 5 ml liquid culture per 650 ml granen. Doe dit bij voorkeur met een lichte draaiende beweging. Zo verspreid je het mycelium optimaal over de steriele granen, wat doorgaans zorgt voor een snellere kolonisatie van het substraat.
Mijn substraat is geënt, wat nu?
Zodra alle containers, potten of zakken zijn geënt, is het tijd voor de incubatiefase. Verplaats de containers naar een warme ruimte met een zo stabiel mogelijke temperatuur. Door optimale groeiomstandigheden te creëren, zal de schimmel het substraat snel koloniseren. Voor meer informatie kun je ons artikel over de incubatie van paddenstoelenbroed raadplegen.