Le colture liquide sono più popolari che mai tra i coltivatori di funghi. Ciò è dovuto al fatto che usarle è sia pratico che sicuro. In questo articolo, discutiamo i pro e i contro delle colture liquide e spieghiamo passo dopo passo come utilizzare al meglio una siringa di coltura liquida.
Indice
Cos'è la coltura liquida?
Quando parliamo di coltura liquida, intendiamo una coltura fungina che cresce in un liquido. Questo liquido è composto con cura e contiene zuccheri, in modo che il fungo possa viverci e crescere. Un ingrediente comunemente usato per la soluzione zuccherina è il miele, perché è economico e facile da trovare. Oltre all’ingrediente base, possono essere aggiunti altri ingredienti per promuovere ulteriormente la crescita del fungo.
Dopo la miscelazione, il liquido deve essere sterilizzato per assicurarsi che non rimangano microrganismi vivi. In questo modo, il fungo può crescere indisturbato nella soluzione zuccherina senza contaminazioni da batteri o altri funghi.
Inoculazione della coltura liquida
Dopo che il liquido è sterilizzato, è necessario aggiungere il fungo. Questo processo è chiamato inoculazione. Una coltura liquida può essere inoculata in diversi modi.
Il metodo più semplice e veloce è aggiungere direttamente le spore di fungo alla soluzione zuccherina sterile. Tuttavia, questo è anche il metodo meno sicuro, poiché c’è una significativa possibilità che le spore siano contaminate. Poiché la contaminazione in una coltura liquida è difficile da rilevare, questo può essere problematico.
Un altro metodo prevede la coltivazione del micelio su un terreno di agar. Questo metodo è molto più sicuro, perché è relativamente facile vedere sull’agar se il micelio è privo di contaminazioni. In tal caso, una piccola quantità di micelio viene aggiunta alla soluzione zuccherina sterile, dopodiché il micelio viene ulteriormente coltivato.
Un grande vantaggio di questo metodo è che permette di creare colture liquide da genetiche selezionate. Genetiche provate e testate portano solitamente a risultati più consistenti nella coltivazione dei funghi.
Quali sono i pro e i contro della coltura liquida?
Le colture liquide presentano una serie di pro e contro. Di seguito una breve panoramica per valutare le opzioni a colpo d’occhio.
| Pro | Contro |
|---|---|
| ✅ Colonizzazione rapida grazie a più punti di inoculazione | ❌ Più suscettibile alla contaminazione e più difficile da diagnosticare |
| ✅ Economico da realizzare | ❌ Non adatto alla selezione di genetiche |
| ✅ Durata di conservazione relativamente lunga se refrigerato |
Come si inocula lo spawn di funghi con una siringa di coltura liquida?
Inoculare lo spawn di funghi con la coltura liquida non è difficile, ma ci sono alcune cose da tenere a mente. Avrai bisogno di vari materiali e strumenti, ed è importante lavorare in un ambiente pulito e in modo igienico. Continua a leggere per saperne di più.
Materiali
Essenziali
- Siringa di coltura liquida
- Grani sterilizzati in un barattolo o sacco con filtro/i a micron e porta di iniezione
- Accendino o bruciatore a gas
- Mascherina
- Guanti in nitrile
- Disinfettante
- Salviettina/e imbevuta/e di alcol
Opzionali
- Cappa a flusso laminare
- Still air box (SAB)
Passaggi
Prima di iniziare a inoculare, è importante scegliere uno spazio di lavoro adatto. Preferibilmente scegli un’area compatta con un flusso d’aria minimo, poiché è più facile da disinfettare. Una volta trovato e preparato uno spazio di lavoro adatto, segui i passaggi seguenti.
1. Disinfetta le mani
Inizia indossando i guanti in nitrile. Disinfettali con un disinfettante appropriato o alcol isopropilico al 70% e lasciali asciugare all’aria.
2. Disinfetta la porta di iniezione
Prendi una salviettina imbevuta di alcol e disinfetta la/le porta/e di iniezione dei tuoi barattoli spawn o sacchi per la coltivazione di funghi. Per maggiore sicurezza, puoi lasciare la salviettina imbevuta di alcol sulla porta di iniezione finché non sei pronto a inoculare.
3. Rimuovi il cappuccio dell'ago
Prendi la siringa di coltura liquida e scuotila bene per sciogliere il micelio. Quindi attacca l’ago alla siringa. Esegui questi passaggi il più rapidamente possibile per evitare contaminazioni.
Infine, rimuovi il cappuccio protettivo dall’ago.
4. Scalda l'ago
Scalda l’ago con un accendino o un bruciatore a gas per uccidere eventuali microrganismi che potrebbero essersi depositati sull’ago nel frattempo.
Fai attenzione quando usi un bruciatore a gas, poiché le parti in plastica dell’ago possono sciogliersi se surriscaldate.
5. Inserisci l'ago nella porta di iniezione
Lascia raffreddare l’ago per qualche secondo dopo averlo scaldato per evitare di danneggiare la porta di iniezione. Quindi rimuovi le salviettine imbevute di alcol dalla/e porta/e di iniezione e inserisci l’ago.
6. Inietta la coltura liquida
Inietta circa 5 ml di coltura liquida per 650 ml di grani. Preferibilmente fallo con un leggero movimento rotatorio. Questo distribuisce il micelio uniformemente sui grani sterili, il che di solito si traduce in una colonizzazione più rapida del substrato.
Il mio substrato è inoculato, e adesso?
Una volta che tutti i contenitori, barattoli o sacchi sono inoculati, è il momento della fase di incubazione. Sposta i contenitori in uno spazio caldo con una temperatura il più stabile possibile. Creando condizioni di crescita ottimali, il fungo colonizzerà rapidamente il substrato. Per maggiori informazioni, consulta il nostro articolo su l’incubazione dello spawn di funghi.